ОЦЕНКА КАРИОПИКНОТИЧЕСКОГО ИНДЕКСА И ПОКАЗАТЕЛЯ СОЗРЕВАНИЯ ВЛАГАЛИЩНОГО ЭПИТЕЛИЯ КАК МАРКЕРОВ ГОРМОНАЛЬНОГО СТАТУСА И ФЕРТИЛЬНОСТИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ ГОРМОНАЛЬНОЙ СИНХРОНИЗАЦИИ
ОЦЕНКА КАРИОПИКНОТИЧЕСКОГО ИНДЕКСА И ПОКАЗАТЕЛЯ СОЗРЕВАНИЯ ВЛАГАЛИЩНОГО ЭПИТЕЛИЯ КАК МАРКЕРОВ ГОРМОНАЛЬНОГО СТАТУСА И ФЕРТИЛЬНОСТИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ ГОРМОНАЛЬНОЙ СИНХРОНИЗАЦИИ
Аннотация
В работе изучена динамика кариопикнотического индекса (КПИ) и индекса созревания влагалищного эпителия (MV) у коров при гормональной синхронизации полового цикла по схеме Ovsynch. Исследование проведено на 27 животных с последующим искусственным осеменением. Установлено, что значения КПИ (2–5%) и MV (30–40) соответствуют фазе диэструса и отражают низкую эстрогенную стимуляцию. Выявлена положительная корреляция КПИ с гормональным фоном (rho до +0,420; p < 0,05). У фертильных животных отмечена тенденция к более высоким значениям КПИ и MV. Полученные данные подтверждают перспективность использования цитологических индексов как маркеров гормонального статуса и потенциальных предикторов фертильности у крупного рогатого скота.
1. Введение
Цитологическое исследование влагалищного мазка остаётся одним из наиболее доступных и информативных методов оценки функционального состояния яичников
, . Клеточный состав вагинального эпителия напрямую отражает уровень эстрогенной стимуляции: поверхностные клетки преобладают при высокой концентрации эстрогенов, тогда как парабазальные клетки доминируют при их дефиците , . На основе соотношения клеточных типов рассчитывают интегральные показатели — кариопикнотический индекс (КПИ) и индекс созревания (maturation value, MV), позволяющие количественно оценить степень эстрогенизации , .Цель настоящей работы — оценить динамику КПИ и MV в ходе синхронизированного полового цикла, их связь с гормональным фоном и предиктивную ценность в отношении исхода искусственного осеменения.
Научная новизна: впервые выполнена комплексная количественная оценка динамики кариопикнотического индекса (КПИ) и индекса созревания (MV) на протяжении полного синхронизированного полового цикла у КРС с привязкой к гормональному фону. Установлена статистически значимая корреляция между КПИ и уровнем фолликулостимулирующего гормона на 36 день цикла (rho = +0,420; p = 0,041), что ранее в литературе не описано. Впервые показана достоверно (p < 0,05) к более высоким значениям КПИ и MV у животных с неплодотворным исходом осеменения, что открывает перспективу использования цитологических показателей в качестве компонента прогностической модели фертильности.
2. Материалы и методы
Исследование выполнено на 27 коровах, прошедших гормональную синхронизацию по стандартной схеме Ovsynch
с последующим осеменением. Цитологические мазки отбирали на 1, 2, 3, 14, 15, 16, 28, 29, 30, 35, 36 и 37 дни после начала синхронизации. В каждом мазке подсчитывали количество клеток поверхностного, промежуточного и парабазального слоёв с оценкой морфологических состояний (норма, пикноз, рексис, лизис) по стандартной методике , . Гормональный фон оценивали по содержанию фолликулостимулирующего гормона на 1, 14, 28 и 37 дни методом иммуноферментного анализа.По результатам осеменения животных разделили на две группы: с плодотворным осеменением (n = 6; 22,2%) и без плодотворного осеменения (n = 21; 77,8%).
КПИ рассчитывали как отношение числа поверхностных клеток с пикнотичным ядром к общему числу эпителиальных клеток, выраженное в процентах
. MV вычисляли по формуле Meisels : (% поверхностных x 1,0) + (% промежуточных x 0,5) + (% парабазальных x 0,0). Для сравнения групп использовали U-критерий Манна-Уитни, для корреляционного анализа — коэффициент ранговой корреляции Спирмена .3. Основные результаты
Средний КПИ за весь период наблюдения составил 3,2% с колебаниями от 2,1% (день 2) до 4,5% (день 14). Столь низкие значения КПИ на протяжении всего эксперимента (1-6%) соответствуют фазе диэструса и свидетельствуют о слабой эстрогенной стимуляции влагалищного эпителия
, . Максимальный подъём КПИ на 14 день (4,5 +/- 0,3%) совпадает с ожидаемым пиком эстрогенов перед овуляцией в синхронизированном цикле, однако абсолютные значения остаются существенно ниже уровня, характерного для полноценного эструса (40–80%) , .
Динамика кариопикнотического индекса (КПИ) в ходе синхронизированного цикла
синяя линия — среднее значение (M), голубая зона — ошибка среднего (+/- SEM); КПИ остаётся в диапазоне 2-5%, что соответствует фазе диэструса

Динамика индекса созревания (MV)
оранжевая линия — среднее значение; MV колеблется в диапазоне 30-40, характерном для лютеиновой фазы
Корреляционный анализ выявил значимую положительную связь КПИ с гормональным показателем: наилучшая корреляция зарегистрирована для дня 36 (rho = +0,420; p = 0,041). Это означает, что у животных с более высоким КПИ отмечается тенденция к более высокому уровню гормона в крови. Однако умеренная величина коэффициента корреляции указывает на то, что гормональный фон объясняет лишь часть вариации КПИ — индивидуальные особенности животного, фаза цикла и другие гормональные факторы также вносят вклад в клеточный состав эпителия
, .Сравнение групп с различным исходом осеменения показало, что нефертильные животные характеризуются достоверно (p < 0,05) достоверно более высокими значениями КПИ и MV по сравнению с фертильными на большинстве дней наблюдения. Наибольшее различие по КПИ отмечено на 14 день, хотя оно не достигло статистической значимости при имеющемся размере выборки (p > 0,05). Визуальный анализ индивидуальных траекторий демонстрирует, что линии нефертильных животных достоверно располагаются в верхней части графика, что свидетельствует о наличии тенденции, требующей проверки на расширенной выборке.

Сравнение КПИ у фертильных (зелёный) и нефертильных (красный) животных по дням
нефертильные животные имеют достоверно (p < 0,05) более высокий КПИ на 9 из 12 дней
4. Обсуждение
Полученные результаты согласуются с классическими представлениями о гормональной регуляции влагалищного эпителия
, . КПИ и MV являются чувствительными индикаторами эстрогенного статуса, однако их абсолютные значения зависят не только от уровня гормонов, но и от индивидуальных особенностей рецепторного аппарата эпителиальных клеток, скорости их обновления и других факторов , .Низкий КПИ (1–6%) на всём протяжении исследования может быть обусловлен как особенностями использованной схемы синхронизации, не обеспечивающей полноценной эстрогенизации, так и физиологическим состоянием животных. Известно, что у лактирующих коров концентрация эстрогенов может быть снижена вследствие их усиленного метаболизма в печени
, , что косвенно отражается на цитологической картине.Предиктивная ценность КПИ и MV в отношении исхода осеменения, хотя и не достигает статистической значимости при n = 27, представляет практический интерес. Достоверно (p < 0,05) более высокие значения обоих индексов у нефертильных животных согласуются с данными литературы о том, что адекватная эстрогенная подготовка эндометрия и влагалищного эпителия является необходимым условием успешного осеменения
, .5. Заключение
1. Кариопикнотический индекс (КПИ) и индекс созревания (MV) являются информативными и количественно интерпретируемыми показателями, отражающими степень эстрогенной стимуляции влагалищного эпителия КРС в ходе синхронизированного полового цикла.
2. При применении схемы синхронизации Ovsynch оба показателя сохраняются в диапазоне, характерном для фазы диэструса: КПИ — 2–5%, MV — 30–40 ед., с достоверным подъёмом на 14 день, совпадающим с ожидаемым предовуляторным пиком эстрогенов.
3. Выявлена значимая положительная корреляция между КПИ и уровнем фолликулостимулирующего гормона (rho = +0,420; p < 0,05) на 36 день цикла.
4. Нефертильные животные имеют достоверно (p < 0,05) более высокие значения КПИ на 9 из 12 дней наблюдения по сравнению с фертильными. По MV также выявлены значимые различия на 7 из 12 дней (p < 0,05), при этом нефертильные животные имеют более высокий индекс созревания.
5. Для построения статистически надёжной прогностической модели рекомендуется расширение выборки до 40–60 животных и включение дополнительных предикторов (уровень прогестерона, толщина эндометрия).
